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①血液標本的采集、運送及貯存
(1)用一次性塑料采血器或硅化玻璃注射器,采靜脈血液。采血技術要熟練,不可過多損傷血管及周圍組織,致使組織液混入血液中。采血時止血帶不可束縛過緊,并不應超過2分鐘。針筒內(nèi)見到回血即應解開止血帶,否則某些凝血及纖溶因子會活化,并可使血細胞比容(Hct)升高。
(2)靜脈采血1.8ml,加入含有109mmol/L枸櫞酸鈉溶0.2ml的試管中,充分混勻。最好用已加有定量枸櫞酸鈉液的專用硅化真空采血管采血,以保證血與枸櫞酸鈉液比例準確,防止凝血因子活化,并保持清潔,防止不潔的試管和不合格橡皮塞的污染。
(3)貯血應用清潔塑料管或硅化玻璃管或其他不沾濕的容器,避免接觸活化凝血因子。取得血液后應盡快送到血液檢驗室。在運送中應避免劇烈振動和日光直射。一般要求自采血到測定不得超過4小時,不可久貯。如在室溫中貯存過久,V因子會破壞;另一方面,在4℃貯存過久,會導致第Ⅶ因子活化。實驗室在取得血樣后應盡快分離血漿并盡快測定。血液如發(fā)現(xiàn)凝固,應棄去不用。
②將氯化鈣凝血活酶溶液,健康人混合凍于血漿和待測血漿,置37%水浴中預溫5分鐘。
③取試管2支,分別加入待測血漿、健康人混合凍干血漿0.1ml,37℃水浴預溫30秒,再加入預溫的25mmol/L氯化鈣凝血活酶溶液0.2ml,混勻,開動秒表計時。
④不斷地傾斜試管至液體流動緩慢趨于停止時,終止計時,記錄所需時間。重復以上測定2~3次,取其平均值。
⑤健康人混合凍干血漿的測定值應在11~13秒范圍,待測血漿PT值取2~3次的平均值報告。
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