磷酸化抗體，其實(shí)就是做磷酸化蛋白質(zhì)的檢測(cè)，但是對(duì)于它的一個(gè)檢測(cè)問題，其實(shí)很多人都不太認(rèn)識(shí)和了解，那么下面就為大家具體介紹一下，磷酸化抗體一些檢測(cè)問題，只有我們對(duì)這些常識(shí)有一些科學(xué)的認(rèn)識(shí)，那么在生活當(dāng)中出現(xiàn)這種情況的時(shí)候，才不會(huì)手足無措。

做磷酸化蛋白質(zhì)的檢測(cè)，在裂解液中一定要加入磷酸酶抑制劑，防止其將磷酸化的蛋白質(zhì)去磷酸化。關(guān)于磷酸化蛋白質(zhì)的檢測(cè)我想說明一下幾點(diǎn)：

1、組織的制備一定要在冰上操作，而且速度要快。如果不是立刻配置樣品最好先放在液氮里冷凍起來，哪怕兩個(gè)小時(shí)之后再制備樣品也有必要如此，因?yàn)榱姿峄牡鞍踪|(zhì)很容易分解。

2、組織裂解液一定要加入磷酸酶抑制劑。最好能夠多加一些蛋白酶的抑制劑。防止各種酶水解蛋白質(zhì)。否則，不僅磷酸化的測(cè)不出，總蛋白質(zhì)也很難測(cè)出來。

3、測(cè)磷酸化蛋白質(zhì)，上樣量可以大一些，以加載量比較大的目標(biāo)分子。

4、一抗和二抗的孵育時(shí)間都可相應(yīng)延長(zhǎng)，我曾經(jīng)做過一抗孵育5小時(shí)（常溫），二抗2小時(shí)的試驗(yàn)，結(jié)果很漂亮。

5、推薦大家用發(fā)光劑顯影法，這樣靈明度要高一些。

6、壓片時(shí)間可以相應(yīng)的延長(zhǎng)。

以上就是關(guān)于磷酸化抗體的介紹，希望通過這些介紹，大家對(duì)這種常識(shí)，有科學(xué)的認(rèn)識(shí)，在生活當(dāng)中，其實(shí)我們更多的了解這些常識(shí)，也是為了幫助我們保證健康，避免一些不利影響的發(fā)生，每個(gè)人都應(yīng)該注重這些認(rèn)識(shí)。