1.放射變應(yīng)原吸附試驗(RAST) 將真菌變應(yīng)原吸附在固相支持物上，加入病人血清。如病人血清內(nèi)含有對該真菌的特異性IgE抗體，則兩相結(jié)合不能洗脫。當再加入用同位素標記的馬抗人IgE血清時，則三者結(jié)合成一帶有放射性的復(fù)合物，可以在γ計數(shù)器上測出具體的放射量。放射量與病人特異性IgE的量成正比?？蓳?jù)以判斷病人是否對真菌變態(tài)反應(yīng)及其過敏的程度。

　　2.酶聯(lián)變應(yīng)原吸附試驗(ELISA) 其原理為先用真菌變應(yīng)原吸附在聚苯乙烯塑料板孔上，然后加入待測病人血清，再加入羊抗人酶標IgE抗體，再加入該酶的底物，中止反應(yīng)。利用其顯色反應(yīng)，在酶標比色儀上測定OD值，以判斷病人對真菌的敏感性及敏感程度。

　　3.嗜堿粒細胞脫顆粒試驗 取病人靜脈血，經(jīng)抗凝處理后，離心層析提取嗜堿粒細胞。將病人嗜堿粒細胞移入兩個試管，分別加入真菌變應(yīng)原及空白變應(yīng)原溶媒。在37℃孵育30min后，用阿利新蘭(Alcian blue)染色，在血細胞計數(shù)器下分別計數(shù)嗜堿粒細胞數(shù)。如果與真菌變應(yīng)原共孵的樣本所計嗜堿粒細胞，少于與空白變應(yīng)原溶媒共孵的樣本30%以上，說明由于特異性抗原抗體反應(yīng)，導(dǎo)致30%以上的嗜堿粒細胞脫顆粒不能在顯微鏡下檢出，即屬陽性反應(yīng)。脫顆粒的百分比越高，顯示過敏程度越重。

　　4.組胺釋放試驗 此試驗的原理在于將病人的血細胞，經(jīng)與真菌變應(yīng)原作用后，檢測其組胺釋放的量。病人對真菌的敏感性越高，組胺釋放的量越高。由此測定病人對真菌的致敏程度。

　　5.真菌培養(yǎng) 真菌抗原抗體的瓊脂擴散試驗，此試驗可對真菌過敏性肺炎、肺泡炎或過敏性支氣管肺曲菌病患者進行特異性診斷。一般采用瓊脂雙擴散法，將病人血清與不同濃度的真菌變應(yīng)原進行擴散試驗，以觀察沉淀線的出現(xiàn)。此法在國內(nèi)對煙曲霉及青霉等抗原均已獲得陽性結(jié)果。對明確病人致病菌種是較好的客觀依據(jù)。

　　6.病人痰液或支氣管分泌物的真菌直接涂片檢查 從病人由深部咳出的新鮮痰液中挑取少許黏稠呈灰褐色的部分，在玻片上薄薄攤開，不等干燥，即以0.05%乳酸棉藍1滴，5min后在顯微鏡下檢查淺藍染色的真菌孢子或菌絲體。若多次檢查陽性，可作為診斷真菌變態(tài)反應(yīng)的參考性依據(jù)。

　　1.抗原皮內(nèi)試驗 這是在真菌變應(yīng)性哮喘的特異性診斷中應(yīng)用最廣的常規(guī)檢測方法。一般用1∶100真菌抗原浸液，采用1ml注射器，配用4號注射針頭，在病人上臂外側(cè)皮內(nèi)輕輕注入0.01～0.02ml，15～20min觀察皮膚反應(yīng)。真菌變應(yīng)原皮膚試驗除出現(xiàn)速發(fā)相反應(yīng)，還經(jīng)常出現(xiàn)遲發(fā)相反應(yīng)，應(yīng)予注意。

　　2.支氣管激發(fā)試驗 結(jié)果準確可靠，由于采用真菌變應(yīng)原制劑作吸入激發(fā)試驗時可誘發(fā)癥狀，應(yīng)在嚴密觀察下進行。因經(jīng)常出現(xiàn)遲發(fā)相反應(yīng)，在試驗后的6～24h內(nèi)可再度出現(xiàn)哮喘反應(yīng)，應(yīng)予注意。詳細試驗方法可參見氣道反應(yīng)性測定一章。

　　3.肺功能檢查 在臨床緩解期的部分哮喘患者中，可有閉合容量(CV)/肺活量(VC)%、閉合氣量(CC)/TLC%、中期流速(MMEF)和Vma×50%的異常。哮喘發(fā)作時，則有關(guān)呼氣流速的各項指標均顯著下降，如第1秒用力呼氣容量(FEV1)、FEVl/用力肺活量 (FVC)%、MMEF均減少。由于氣體阻塞和肺泡過度膨脹，結(jié)果殘氣量(RV)、功能殘氣量(FRC)及RV/TCL比值增大。當吸入1%異丙基腎上腺素或0.2%沙丁胺醇霧化液后，上述指標可有改善，如果FEV1增加15%以上，則有助于支氣管哮喘的診斷。中度或重度哮喘，吸入氣體在肺內(nèi)分布不均，通氣/血流比率失調(diào)，生理死腔和生理靜-動脈分流增加，導(dǎo)致PaO2降低，但PaCO2正?；蛏詼p低。當嚴重哮喘或哮喘持續(xù)狀態(tài)，PaO2進一步下降，由于呼吸肌疲勞，PaCO2可增加，并發(fā)呼吸性酸中毒，預(yù)示病情嚴重。

　　4.氣道反應(yīng)性測定 吸入組胺、醋甲膽堿、二氧化硫、前列腺素F2α、服用β阻滯劑、運動負荷等，均可誘發(fā)哮喘。可通過測定FEVl、最大呼氣流速、氣道阻力等檢測。在吸入激發(fā)劑后，立即并每隔15～30min復(fù)查1次。一般采用醋甲膽堿，因其反應(yīng)快，作用時間短，從0.05mg/L開始，逐漸增量，至吸入后FEV1減低超過20%，或氣道傳導(dǎo)率下降大于35%，稱為該藥的閾值。哮喘患者吸入醋甲膽堿引起氣道痙攣的敏感性較正常人高100～1000倍。激發(fā)藥物劑量-反應(yīng)曲線的斜率稱為反應(yīng)性，哮喘患者反應(yīng)性增高，吸煙者也較非吸煙者升高。誘發(fā)的氣道阻塞經(jīng)15～30min可自然消失，但在發(fā)作期的患者可引起嚴重哮喘，甚至導(dǎo)致窒息，故需嚴格掌握適應(yīng)證，并準備好支氣管擴張劑、抗休克藥物和其他搶救措施。近年來采用氣道反應(yīng)測定儀，連續(xù)記錄氣道阻力，當其上升2倍，或持續(xù)升高2min時的藥物累積量作為敏感性指標。吸入生理鹽水時的氣道阻力，稱為起始阻力;氣道阻力上升時吸入藥物的最小累積量，稱為反應(yīng)閾值;單位醋甲膽堿累積量的氣道阻力上升值，稱為阻力上升度;每毫升含1mg藥物，吸入1min為1個單位。反應(yīng)閾低于3個單位為敏感性增高，哮喘患者均值為1.08單位;阻力上升度大于每單位每秒0.5cmH20/L為反應(yīng)性增高，故哮喘患者的敏感性及反應(yīng)性均增高。氣道反應(yīng)性測定對隱匿型哮喘的診斷很有價值，在患者平靜呼吸的情況下可作出診斷。